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更新時(shí)間:2024-11-04
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產(chǎn)品名稱:小鼠牙齦上皮細(xì)胞
組織來源:牙齦組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
小鼠牙齦上皮分離自牙齦組織;牙齦是附著在牙頸和牙槽突部分的粘膜組織,呈粉紅色、有光澤、質(zhì)堅(jiān)韌。牙齦邊緣稱為齦緣,正常呈月芽形。齦緣與牙頸之間的小溝稱齦溝。兩鄰牙之間的牙齦突起稱齦乳突。也叫齒齦,通稱牙床;是指包住齒頸的黏膜組織,粉紅色,內(nèi)有很多血管和神經(jīng)。牙齦上皮長(zhǎng)期被認(rèn)為是抵御口腔中持續(xù)存在的細(xì)菌的被動(dòng)免疫屏障,隨著對(duì)牙周致病菌的不斷認(rèn)識(shí),發(fā)現(xiàn)牙齦上皮不僅僅是抵御微生物的物理屏障,上皮細(xì)胞還可以分泌抗菌多肽,參與先天性免疫。牙齦上皮作為牙周組織的道屏障,在抵御牙周炎細(xì)菌入侵的過程中發(fā)揮了重要作用,建立正常牙齦上皮細(xì)胞體外培養(yǎng)體系,將為各種牙齦上皮相關(guān)的研究提供穩(wěn)定的實(shí)驗(yàn)?zāi)P汀?/span>
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠牙齦上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠牙齦上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟:
一、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a)、對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞,脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b)、對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
公司正在出售的產(chǎn)品:
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小鼠血管生成素2(ANG-2)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human leukocyte aigen E (HLA-E) ELISA Kit 人類白細(xì)胞抗原E(HLA-E)試劑盒
Humanpara-aminobenzoicacid,PABAELISAKit 人對(duì)(PABA)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
ACTH試劑盒魚促腎上腺皮質(zhì)激素規(guī)格:96T/48T
油脂DNA萃取試劑盒10次
MouseIerferonβ,IFN-β/IFNBELISAKit小鼠β干擾素(IFN-β/IFNB)試劑盒規(guī)格:96T/48T
DKK2單克隆抗體
蛋白酶體20S LMP7抗體
TNFSF11重組小鼠 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
表皮生長(zhǎng)因子(EGF)重組蛋白 Recombinant Epidermal Growth Factor (EGF)
ARL2BP重組人 ARL2BP / BART1 蛋白 Protein
CD40LG Protein Human 重組人 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
IFNA8 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 Interferon alpha-B / IFNA8 蛋白
表皮生長(zhǎng)因子(EGF)重組蛋白 Recombinant Epidermal Growth Factor (EGF)
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IFNA8 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 Interferon alpha-B / IFNA8 蛋白
ARL2BP重組人 ARL2BP / BART1 蛋白 Protein
小鼠牙齦上皮細(xì)胞大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)試劑盒 ,英文名: MCP-1/CCL2/MCAF ELISA Kit
Porcine apolipoprotein A1 (apo-A1) ELISA Kit 豬載脂蛋白A1(apo-A1)試劑盒
ELISA 小鼠凋亡誘導(dǎo)因子(mouse AIF) 進(jìn)口分裝
CLIAKitforLPAb-IgG(HumanLegionellaaibodyIgG)ELISAKit人軍團(tuán)菌抗體IgG
通用型DAB顯色溶液A液:10毫升B液:90毫升
ELISAKitIL-17雞白介素17
收到細(xì)胞如何處理?
1、首先,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請(qǐng)拍照,并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí),若細(xì)胞密度超過80%,可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作