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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱(chēng)：
豬雪旺氏細(xì)胞
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
豬雪旺氏細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：乙型肝炎病毒X蛋白上調(diào)基因11抗體 人前脂肪細(xì)胞 LUC7L2蛋白抗體 小鼠毛囊干細(xì)胞 MEX3A蛋白抗體 人腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞 毛發(fā)角蛋白33A抗體 小鼠骨髓細(xì)胞系；IDG-SW3
產(chǎn)品型號(hào)：
廠商性質(zhì)：經(jīng)銷(xiāo)商
訪問(wèn)量：1276
更新時(shí)間：2024-11-07
產(chǎn)品特性Product characteristics
豬雪旺氏細(xì)胞
商品屬性：
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
神經(jīng) | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 雙極、多極形 | YS-01X8559 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
豬雪旺氏細(xì)胞分離神經(jīng)組織；周?chē)窠?jīng)系統(tǒng)中的神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞稱(chēng)施萬(wàn)（schwann，又名雪旺細(xì)胞）細(xì)胞，它沿神經(jīng)元的突起分布。施萬(wàn)細(xì)胞包裹在神經(jīng)纖維上，這種神經(jīng)纖維叫有髓神經(jīng)纖維。有髓神經(jīng)纖維和無(wú)髓神經(jīng)纖維的施萬(wàn)細(xì)胞的形態(tài)和功能有所差異，施萬(wàn)細(xì)胞的外表面有基膜，能分泌神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子，促進(jìn)受損的神經(jīng)元的存活及其軸突的再生，參與周?chē)窠?jīng)系統(tǒng)中神經(jīng)纖維的構(gòu)成。施萬(wàn)細(xì)胞的胞核呈長(zhǎng)卵圓形，其長(zhǎng)軸與軸突平行，核周有少量胞質(zhì)。由于施萬(wàn)細(xì)胞包在軸突的外面，故又稱(chēng)神經(jīng)膜細(xì)胞（neurilemmalcell），它的外面包有一層基膜。施萬(wàn)細(xì)胞外面的一層胞膜與基膜一起往往又稱(chēng)神經(jīng)膜（neurilemma），光鏡下可見(jiàn)此膜。在有髓神經(jīng)纖維發(fā)生中，伴隨軸突一起生長(zhǎng)的施萬(wàn)細(xì)胞表面凹陷成一縱溝，軸突位于縱溝內(nèi)，溝緣的胞膜相貼形成軸突系膜（mesaxon）。軸突系膜不斷伸長(zhǎng)并反復(fù)包卷軸突，把胞質(zhì)擠至細(xì)胞的內(nèi)、外邊緣及兩端（即靠近郎氏結(jié)處），從而形成許多同心圓的螺旋膜板層，即為髓鞘。故髓鞘乃成自施萬(wàn)細(xì)胞的胞膜，屬施萬(wàn)細(xì)胞的一部分。施萬(wàn)細(xì)胞的胞質(zhì)除見(jiàn)于細(xì)胞的外、內(nèi)邊緣和兩端外，還見(jiàn)于髓鞘板層內(nèi)的施－蘭切跡。該切跡構(gòu)成螺旋形的胞質(zhì)通道，并與細(xì)胞外、內(nèi)邊緣的胞質(zhì)相通。
方法簡(jiǎn)介：
實(shí)驗(yàn)室分離的豬雪旺氏采用 - 膠原酶混合消化法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
實(shí)驗(yàn)室分離的豬雪旺氏經(jīng)S-100免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：含FBS、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：雙極、多極形
傳代特性：可傳1-2代
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
豬雪旺氏體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專(zhuān)用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
兔子Ⅲ型膠原(ColⅢ)試劑盒
兔子Ⅱ型膠原(ColⅡ)試劑盒
兔子Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)試劑盒
兔子Ⅰ型膠原(ColⅠ)試劑盒
20號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框19抗體
單體橙紅色熒光蛋白單克隆抗體
ART4重組大鼠 ART4 蛋白 Protein
ECP(eosinophil cationic protein 0.5mgECP(eosinophil cationic protein)mouse rat 嗜酸性粒細(xì)胞陽(yáng)離子蛋白抗原
ARG1重組人 ARG1 / Arginase 1 蛋白 Protein
GPR37 Protein Human 重組人 GPR37 蛋白
LIFR Protein Mouse 重組小鼠 LIFR / CD118 蛋白
ECP(eosinophil cationic protein 0.5mgECP(eosinophil cationic protein)mouse rat 嗜酸性粒細(xì)胞陽(yáng)離子蛋白抗原
GPR37 Protein Human 重組人 GPR37 蛋白
ART4重組大鼠 ART4 蛋白 Protein
LIFR Protein Mouse 重組小鼠 LIFR / CD118 蛋白
ARG1重組人 ARG1 / Arginase 1 蛋白 Protein
小鼠β基己糖苷酶A(β-hexosaminidase A)ELISA pcr檢測(cè)試劑盒
Rat eosinophil chemotactic factor (ECF) ELISA Kit 大鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化因子(ECF)試劑盒
Humanoxytocin,OTELISAKit 人催產(chǎn)素(OT)pcr檢測(cè)試劑盒分裝
Humancholecystokininoctapeptide,CCK-8試劑盒人膽囊收縮素/縮膽囊素八肽(CCK-8)試劑盒規(guī)格：96T/48T
滋養(yǎng)細(xì)胞法胚胎干細(xì)胞繁殖試劑盒10次
Humansecretieceptor,SRELISAKit人促胰液素/分泌素受體(SR)試劑盒規(guī)格：96T/48T
豬雪旺氏細(xì)胞大鼠色胺酸羥化酶2(TPH2)試劑盒 ，英文名： TPH2 ELISA Kit
Mouse aial naiuretic peptide (ANP) ELISA Kit 小鼠心肽(ANP)試劑盒
RatBeta-Endorphin,β-EPELISAKit 大鼠β內(nèi)啡肽(β-EP)pcr檢測(cè)試劑盒分裝
CLIAKitforHABP(MouseHya]uronatebindingprotein)ELISAKit小鼠透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白
細(xì)胞半胱蛋白酶-6(CASPASE-6)活性熒光定量試劑盒20次
RatvisfatinELISAKit大鼠內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素(visfatin)試劑盒規(guī)格：96T/48T
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些，至少為5×108細(xì)胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落，漂浮；
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細(xì)胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行；
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進(jìn)行分瓶試驗(yàn)；
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí)，淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清，以利細(xì)胞生長(zhǎng)；
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行
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